影印平板培养法的原理和分析

什么是影印平板培养法?它有何理论与实践应用?

哎,其实我已经做了几年的复印板培养法了。
我记得当时我在研究所。
我记不清具体是哪一年了,但总之是很早了。

当时我们搞抗生素筛选,就是为了找到那些耐药菌。
老办法就是胡乱挑,再怎么辛苦,也偏偏太性感了。
后来我了解到J. Lederberg和他的妻子所做的事情以及他们1 9 5 2 年的论文,我当时认为这很棒。

操作起来并不复杂。
只需使用覆盖有细菌菌落的母板,将其倒置,并将其放在用消毒绒布包裹的圆筒上即可。
如果你仔细想想,那些小点(菌落)会摩擦到天鹅绒布上。
布的作用就像软密封件。

然后,拿起这个“印章”并将其印在不同的选择性介质上。
比如有的放庆大霉素,有的放链霉素等等。
通过来回查找,您可以在子板上找到那些抗性或其他突变类型。

我傻了。
第一次做的时候,丝绒布一定要洗干净,没有细菌,不然就乱七八糟了。
还有那个圆筒,转动是否均匀也很重要。
记得有一次我转得太快,绒布上都沾满了浆糊。
结果整个果盘都沾满了水果,什么也筛不出来。
我很着急。

至于效率,当时的文献称可以转移1 0%-2 0%的细菌。
当时我们大概可以扭转1 5 %左右,这已经很不错了。
一密封可容纳 8 粒药片。
有时我们太忙了,所以我们盖上6 ,留下两个重做。

总的来说,这个方法非常好,特别适合筛选各种突变类型。
后来技术进步了,有了全自动的方法,但影印板培养法这个老方法,还是需要一些了解。

影印平板法理论(实验步骤)

嘿嘿,我们来说一下复印平板的方法吧。
我记得我们第一次使用这个方法是在2 01 6 年,当时我们实验室正在筛选耐药菌株。
说起来,这件事其实还蛮有趣的。

理论上来说,复印制版法就像一台复印机,但它复制的是细菌。
它使用灭菌的天鹅绒印章将菌落从主板复制到选择性培养基板上。
目标是识别在特定条件下突变的菌株,例如对抗生素具有耐药性的菌株。

关于实验步骤,首先要准备一个母板,就是那种涂有细菌悬浮液的板。
需要保证每个平板上的菌落数在5 0到3 00之间,不能太多也不能太少。

然后,制作印章。
这个印章是用一块消毒过的绒布固定在一个圆柱形的木块上,相当简单。
接下来,将生长有菌落的母板倒置在印模上,轻轻按压将菌落附着在印模上。
据说这种方法可以转移1 0%到2 0%的细菌,效率相当高。

然后,用此印记将其接种到选择性培养基平板上,然后轻轻按压,形成菌落印记。
这个过程可以重复多次,以接种最多 8 个亚培养皿。

最后,培养和观察。
培养一段时间后,通过比较复制板和母板上菌落的生长情况,即可鉴定突变菌落。

这个方法对我来说还是比较实用的。
通过复印平板法,我们实验室筛选出了很多潜在的耐药菌株。
总而言之,这个技巧效果很好,值得一试。

平板分离纯化技术是谁发明的

嘿,还记得那些使用印版复印方法的莱德伯格吗? 1 9 5 2 年,我在实验室第一次发现了这项技术。
那时我刚学完,什么都不懂,就跟着师傅走。
他们当时使用的平板复印方式看似很先进,但其实使用起来还是相当简单的。

当时,你首先要把培养基加热融化,而且要小心不要烧着它。
然后按照无菌程序将融化的培养基倒入培养皿中。
倒入时应缓慢,以免溅出。
然后,您必须在培养皿上标记区域并一一绘制小网格。
这一步非常关键。
如果标记错误,后面的步骤就彻底泡汤了。

然后是绘图操作。
我使用接种环。
我必须在生长介质的表面画一条线,然后用酒精灯烧它以避免污染。
这一步必须快速、准确、毫不犹豫地完成。
画好线后,就该练习了。
当时我们把它放在培养箱里,必须控制好温度,否则微生物就无法生长。

现在回想起来,当时我真的什么都不懂。
不过跟着师傅一步一步的操作,我真的学会了。
这个过程虽然简单,但每一步都不能掉以轻心。
就像在生活中,你必须认真对待每一件事,因为一个小小的疏忽就会毁掉你所有的努力。
呵呵,说到这里,我突然想起一个笑话,我给你讲讲吧。
当时我师傅也说,平板复印法就像玩“连连看”,要把微生物一一“连接”起来,然后分开。
哈哈哈,真是太合适了。

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