两种高效方法解析：如何从混合菌液中筛选营养缺陷型菌株

如何从野生型和营养缺陷型混合菌液中检出营养缺陷型菌株???至少俩种方法~~~并说明其原理

影印平板法的理论（实验步骤）

将带有许多菌落的母培养板倒置在覆盖有消毒天鹅绒布的木制圆柱形印章上，以便污渍粘在板上。
然后可以将这个“密封”上的菌落顺序接种到不同的选择性培养基平板中。
一旦培养平板并比较每个平板上相同位置的菌落，就可以选择合适的突变菌株。
据了解，这种方法可以将母板上10%-20%的细菌转移到绒织物上，而这个“密封”可用于接种8个二次培养板。
具体实验流程为：将待测菌悬液浓缩后涂于合适的平板上，等待其与母板一样生长（每板菌落数控制在50～300个）；小块消毒过的天鹅绒。
将其固定在直径略小于圆盘的圆柱形木块上，形成密封（即疫苗接种装置）；然后将带有菌落的母板倒置。
轻轻印在天鹅绒贴片上；然后将此补丁轻轻打印到另一个含有选择性介质的板上。
培养后，菌落在选择培养基板上生长，对应于母板上菌落的位置。
复制板和母板上，可从母板相应位置选择待测突变菌落。
复制方法最初设计的目的是为了证明微生物的耐药突变是自发的，与相应的环境因素无关。
已广泛应用于援助筛选、耐药菌株筛选等研究工作。

影印培养试验的内容

基本流程：将含有多个菌落（最多可达数百个）的母培养皿倒置在铺有消毒绒布的木筒（直径略小于培养皿）上，然后放置。
每个“密封”上的细菌都被一一接种到不同的选择性培养板上。
孵育后，可以通过比较每个平板上相同位置的菌落来选择合适的突变类型。
据悉，采用该方法可将母板10-20%的细菌转移至绒布上，可用于接种8个继代培养板。
因此，可以通过复印培养物从在非选择性条件下生长的细菌群体中分离出各种类型的突变体。
右图为利用培养物复印技术进行的实验，证明大肠杆菌K12自发产生对链霉素产生耐药性的突变。
一般方法：先将大量链霉素敏感的大肠杆菌K12涂于无链霉素平板（1）表面，等待密集的小菌落生长，然后用影印法接种无链霉素平板。
(1)复制到含有链霉素的培养基板(2)上，然后复制到含有链霉素的选择性培养基板(3)上。
复印功能可以确保这三个平板上生长的菌落的关系和相对位置的严格对应。
培养后，平板上出现了分离的链霉素抗性菌落(3)。
通过比较培养皿（2）和（3），可以在培养皿（2）的相应位置检测培养皿（3）上的稳定菌落的“孪生兄弟”。
然后选择平板（2）最明显部分的菌落（实际上是很多菌落）放入不含链霉素的培养液（4）中，培养后铺在平板（5）上，重复上述步骤。
上述过程重复几次后，随着原来的细菌越来越少溶液中，越来越多的耐药菌落出现，最终甚至有可能获得完全纯净的耐药菌群体。
可见，原始链霉素敏感菌株仅经历了迁移(1)→(2)→(4)→(5)→(6)→(8)→(9)→(10)→(12)通过播种和选择序列，可以在完全不接触链霉素的情况下筛选大量链霉素抗性菌株。